Wenn ein Forschungspeptid als \u201cHPLC-verifiziert\u201d oder \u201cHPLC + MS-gepr\u00fcft\u201d bezeichnet wird, kommen dabei zwei sich erg\u00e4nzende Analysemethoden zum Einsatz. Sie werden oft gemeinsam genannt, messen jedoch unterschiedliche Gr\u00f6\u00dfen. Wenn man diesen Unterschied kennt, l\u00e4sst sich jedes Analysezertifikat leichter interpretieren.<\/p>\n
Bei der Hochleistungsfl\u00fcssigkeitschromatographie wird eine gel\u00f6ste Probe unter hohem Druck durch eine gepackte S\u00e4ule gepresst. Verschiedene Molek\u00fcle durchlaufen die S\u00e4ule mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten, je nachdem, wie stark sie mit dem S\u00e4ulenmaterial interagieren, sodass sich das Hauptpeptid von verwandten Verunreinigungen trennt. Ein Detektor erfasst jede Komponente als Peak. Durch Integration der Fl\u00e4che unter dem Hauptpeak im Verh\u00e4ltnis zur Gesamtfl\u00e4che berechnet ein Analytiker den Reinheitsgrad in Prozent.<\/p>\n
Die HPLC ist daher eine Reinheit<\/strong> Tool. Es gibt Auskunft dar\u00fcber, wie viel Prozent der Probe auf die dominierende Verbindung im Vergleich zu allen anderen Bestandteilen entfallen \u2013 allein daraus l\u00e4sst sich jedoch nicht ableiten, um welche dominierende Verbindung es sich tats\u00e4chlich handelt.<\/p>\n Bei der Massenspektrometrie (MS) werden die Molek\u00fcle ionisiert und ihr Masse-zu-Ladungs-Verh\u00e4ltnis mit hoher Pr\u00e4zision gemessen. Bei einem Peptid wird die gemessene Masse mit der theoretischen Masse verglichen, die sich aus seiner Aminos\u00e4uresequenz ableiten l\u00e4sst. Eine gute \u00dcbereinstimmung best\u00e4tigt Identit\u00e4t<\/strong>: Das Molek\u00fcl entspricht tats\u00e4chlich der auf dem Etikett angegebenen Sequenz und ist kein anderes Peptid \u00e4hnlicher Gr\u00f6\u00dfe.<\/p>\n MS ist ein Identifizierungsinstrument. Es eignet sich hervorragend, um zu best\u00e4tigen, dass \u201ces sich um das richtige Molek\u00fcl handelt\u201d, dient jedoch nicht in erster Linie der Quantifizierung der Reinheit.<\/p>\n Betrachten Sie die L\u00fccken, die die einzelnen Techniken hinterlassen:<\/p>\n In Kombination beantwortet die HPLC die Frage \u201cWie rein?\u201d und die MS die Frage \u201cHandelt es sich um das richtige Molek\u00fcl?\u201d. Ein Analysezertifikat (COA), das beide Verfahren umfasst, liefert ein weitaus vollst\u00e4ndigeres Bild als jedes der beiden Verfahren f\u00fcr sich allein. Aus diesem Grund hat sich \u201cHPLC + MS\u201d zum praktischen Standard f\u00fcr die Dokumentation von Peptiden in Forschungsqualit\u00e4t entwickelt.<\/p>\n In einem kombinierten Bericht sollten Sie ein HPLC-Chromatogramm (im Idealfall einen sauberen, dominanten Peak mit Angabe des Reinheitsprozentsatzes) sowie ein MS-Spektrum oder eine Tabelle sehen, in der die gemessene Masse neben der berechneten Masse angegeben ist. \u00dcberpr\u00fcfen Sie, ob die gemessene Masse mit dem Molekulargewicht in der Produktspezifikation \u00fcbereinstimmt und ob der Reinheitswert der von Ihnen bestellten Qualit\u00e4t entspricht.<\/p>\n Sobald Sie diese beiden Methoden klar voneinander unterscheiden k\u00f6nnen, ist das COA eines Forschungspepids nicht mehr nur eine Aneinanderreihung von Zahlen, sondern erm\u00f6glicht eine schnelle und zuverl\u00e4ssige \u00dcberpr\u00fcfung.<\/p>\n Bei den genannten Verbindungen handelt es sich um Referenzmaterialien in Forschungsqualit\u00e4t, die ausschlie\u00dflich f\u00fcr den Laborgebrauch bestimmt sind und nicht f\u00fcr den Verzehr durch Menschen oder Tiere geeignet sind.<\/em><\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":" HPLC und Massenspektrometrie liefern Antworten auf zwei unterschiedliche Fragen zu einem Peptid. Wenn man versteht, was die jeweiligen Verfahren messen, l\u00e4sst sich jedes Analysezertifikat leichter lesen.<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":111,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[6],"tags":[],"class_list":["post-25","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-quality-testing"],"yoast_head":"\nWas die Massenspektrometrie misst: Identit\u00e4t<\/h2>\n
Warum beide zusammen verwendet werden<\/h2>\n
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Die beiden Ergebnisse nebeneinander betrachten<\/h2>\n
Praktische Tipps<\/h2>\n
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